Temas Livres do LIII Congresso Brasileiro de Cardiologia
TL 308
Dexametasona estimula a atividade da Enzima Conversora de Angiotensina I (ECA) em
cultura primária de fibroblastos cardíacos de rato.
M. Luisa M. Barreto-Chaves, José Xavier-Neto, José E. Krieger.
Lab. Bio.Mol. - InCor, F. Pró-Sangue, São Paulo, S.P.
Objetivos: Caracterizar a regulação da atividade da ECA em cultura primária de
fibroblastos cardíacos de rato, sob efeito da Dexametasona.
Métodos: As células foram isoladas de coracão de ratos Wistar adultos, por
digestão enzimática, e cultivadas em D-MEM com 10% FBS até à 4a passagem.
24 horas antes do início dos tratamentos o meio foi trocado para 0,5% FBS. A atividade da
ECA foi determinada no meio de cultura e no homogenato celular pelo método
fluorimétrico, utilizando-se Hippuril-His-Leu como substrato. A concentração de
proteína celular foi avaliada pelo método de Bradford.
Resultados: Em condições basais a atividade da ECA em fibroblastos cardíacos
não é detectável. O tratamento com dexametasona, por 43 horas, promove um aumento
dose-dependente na atividade da enzima (de níveis não detectáveis, 10-12 M a
3,0 nmoles His-Leu x mg-1 x h-1, 10-6 M), atingindo
níveis máximos após 96 hs. Não foi observada atividade da ECA nas dosagens realizadas
no meio de cultura. A indução na atividade da enzima é bloqueada por cicloheximida (5m g/ml) e actinomicina D (5m g/ml).
Conclusões: Os resultados indicam que a Dexametasona promove um aumento na
atividade da ECA, sugerindo que o glicocorticóide modula a expressão gênica da enzima
em fibroblastos cardíacos de rato.
Apoio Financeiro: FAPESP, CNPq, FINEP, Fund. E.J. Zerbini, Fund. Pró-Sangue, S.P.
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